�ɹⶨ��PCR ������������\(y��n)���ٶȿ�����(sh��)�(y��n)�Y(ji��)����(zh��n)�_���ܵ�Խ��Խ��ķ�������W(xu��)�о�����A���ڌ�(sh��)�(y��n)���g(sh��)����Ľ�����Ҳ�S��(du��)����f�����y�ò��nj�(sh��)�(y��n)���g(sh��)�ϵĆ��}���������x����һ�N�ɹⶨ��PCR�x������Ҫ��ԃ��(sh��)�(y��n)�ҳɆT����Ҋ��������(sh��)�(y��n)��Ŀǰ��������������ƽ�⌍(sh��)�(y��n)�ҵ��A(y��)������ҪԔ��(x��)�о����N�O���T�����������Y�����挦(du��)���N��ͬ���ܵĮa(ch��n)Ʒ������ԓ����x������
���Ƚ��h����߳��J(r��n)�R(sh��)�ɹⶨ��PCR�ăɂ�(g��)�`�^(q��)��
�`�^(q��)һ���x��ͨ��Խ��Խ��
�S��PCR���g(sh��)�ij����\(y��n)�ã�����?c��i)U(ku��)��Խ��Խ���[���ɹⶨ��PCR�xҲ���������������ABI��˾�Ƴ��Ć�ͨ���ɹⶨ��PCR�x�l(f��)չ��������(g��)�S�Ҷ��Ƴ�4ͨ����5ͨ������6ͨ���ɹⶨ��PCR�x���ۻ����y���x���˟o���m�ģ�������һ��С�����M(j��n)�ˡ�ͨ��Խ��Խ�á����`�^(q��)��
��ʹ����Щ�S��5ͨ���ğɹⶨ���x�r(sh��)�����˴_����(sh��)�(y��n)�Y(ji��)���ľ��_�Ժ͜�(zh��n)�_�Զ�Ҫ�ڌ�(sh��)�(y��n)��ʹ��ROX��һ�N�ɹ�Ⱦ�ϣ���?q��)��õ�Reference dye ���@Щ�ɹ�Ⱦ�϶���횆Ϊ�(d��)ʹ��һ��(g��)�z�yͨ�����@���ԁ��������ܙz�y����PCR�ɹ���̖(h��o)����Чͨ��ֻ��4��(g��)������ʹ��У��Ⱦ�Ͽ��ܕ�(hu��)���Ӻ��ڵ�ʹ�óɱ����еğɹⶨ��PCR�ęz�yͨ����ֻ�����яS�ҵČ��õğɹ�Ⱦ�ϻ�ԇ���_�ŵ�����Ч�z�yͨ��Ҳ�^���������Y�������Q����ô�ࡣ��ُ�Iǰ�_�J(r��n)�ɹⶨ��PCR�x������Ч�z�yͨ���Ȟ���Ҫ�����܆Ά�ֻ ������
���]����?z��)ɹⶨ��PCR��ͨ����(sh��)�ĕr(sh��)��Ҳ��(y��ng)ԓ�Č�(sh��)�(y��n)�Ҍ�(sh��)�H��r���l(f��)������PCR���������m�������˿��ã���?y��n)���ʹ�?sh��)�(y��n)��(f��)�s������
�`�^(q��)����real-time PCR�x�o���ݶȹ���
��(du��)��ʹ��Ⱦ�Ϸ��Ķ���PCR����(y��ng)���mȻ�и��N���ӵ�PCR�����O(sh��)Ӌ(j��)ܛ�����߽�(j��ng)�(y��n)��ʽӋ(j��)���۽�ضȣ�Tmֵ�������\(y��n)�õĹ�ʽ��ͬ���������в�ͬ��Tmֵ�IJ��(hu��)�ܴ���������۽�ضțQ�����˻�ض�������ģ���ЉA���ĽM��ǧ׃?n��i)f������(du��)������Ƭ������(j��ng)�(y��n)��ʽ�õ��Ĕ�(sh��)��(j��)��һ���ܵó���(zh��n)�_�ĽY(ji��)�����˻�ضȼ�(x��)�IJ��(du��)�Y(ji��)�������ܮa(ch��n)���Q���Ե�Ӱ�����������l����һ�����˺��^�۵Ć��}���ݶ�PCR�ij��F(xi��n)���ֽ�Q��һЩ���}�����ڷ���(y��ng)�^����ÿ��(g��)�Ĝضȿ��Ɨl��������ָ��������(n��i)�����ݶ�׃��������(j��)�Y(ji��)����һ���Ϳ������������m�ϵķ���(y��ng)�l����
�����˻�ض����B׃�ԜضȺ�����ضȶ����ԃ�(y��u)��������(du��)�ڶ�N�ۺ�ø���ø�U(ku��)����Invitrogen��Clontech��Promega�Ķ���(sh��)�߱���Taqø���f�@��(g��)�dz���Ҫ����?y��n)�Taq��У��ø����ѷ���(y��ng)�ضȿ������@�������(y��u)������ضȾ��@�ú���Ҫ��
ʹ�����ݶȹ��ܵğɹⶨ��PCR����һ�����������Ό�(sh��)�(y��n)������ɵă�(y��u)���^�������������� PCR����(y��ng)�l���ķ�����(sh��)�(y��n)���ȹ�(ji��)ʡ��(sh��)�(y��n)�r(sh��)�g���Ч�ʣ��ֹ�(ji��)ʡ��(sh��)�(y��n)�ɱ���
��(d��ng)�҂��߳��`�^(q��)����Ҫ�x��һ�����m���Լ�����ğɹⶨ��PCR�x�r(sh��)�҂���ԓ�P(gu��n)עЩʲô�أ�
1�� �x���ęz�yͨ��
��ُ�I����PCR�x�ĕr(sh��)��Ҫ����(j��)��(sh��)�(y��n)��(sh��)����Ҫ���x��ͬͨ���ăx����Ŀǰ�����ϵğɹⶨ��PCR�ęz�yͨ��С��16��(g��)�ൽ384��(g��)������M(j��n)��һ��Ļ�����_(d��)�о���ԭ�w�z�y����(sh��)�ڲ���ُ�I���F�ăx����96��ͨ�����������Ҫ����Ҫ��ˎ���c(di��n)�ͼ�����(bi��o)ӛ�Č�(sh��)�(y��n)�ҿ��Կ��]ُ�I384�װ�ăx�������罛(j��ng)�M(f��i)���ޟo��ُ�I384�װ�x���Č�(sh��)�(y��n)�ң����Կ��]ُ�I�\(y��n)���ٶȿ죨����FASTģ�K����96�װ�ɹⶨ��PCR�x�����˸�ͨ���ăx�������(hu��)�l(f��)�F(xi��n)��Ʒ���Ƃ��С�wϵ�����ӱ���PCR�wϵ��(g��u)���ɞ����ƌ�(sh��)�(y��n)�ٶȺͽY(ji��)�����iƿ��
2�� Ӳ���O(sh��)Ӌ(j��)���c(di��n)
�ɹⶨ��PCR�x��Ҫ�Ђ��y(t��ng)��96�װ�ʽ����(chu��ng)�µ��x��ʽ����ÿ�N�O(sh��)Ӌ(j��)�������Ī�(d��)��֮̎��Ҳ���Пo�������ȱ����
���y(t��ng)��96�װ�ğɹⶨ��PCR�����ݼ{�Ęӱ����������ҟo������ĺIJ�����Щ���y(t��ng)��96�װ�ăx�������u�u�����l(f��)��CCD�z�y���@Щ��W(xu��)�Y(ji��)��(g��u)��96�װ��픲���ÿ��(g��)��Ʒ���Դ�͙z�y���Ĺ�̸�����ͬ����߅��Ч��(y��ng)����(du��)�Y(ji��)���a(ch��n)��Ӱ푡����˱��C���_����(zh��n)�_�Č�(sh��)�(y��n)�Y(ji��)�����@x���ڌ�(sh��)�(y��n)�^����ͨ����(hu��)ʹ��ROX��һ�N�ɹ�Ⱦ�ϣ���?q��)��õ�Reference dye���酢��У����(sh��)�(y��n)�Y(ji��)�����u�u����ʹ�É����̡����Q�ɱ��^���ѽ�(j��ng)�ɞ�ܶ��Ñ��^ʹ�Ć��}���ڌ�(sh��)�(y��n)�^�����u�u������һ�N���Դ���a(ch��n)���^�����܌�(du��)��(sh��)�(y��n)�Y(ji��)����һ����Ӱ���CCD���ă�(y��u)�c(di��n)���ǿ���ͬ�r(sh��)�������И�Ʒ�еğɹ���̖(h��o)�������`�����^��������ͬ�r(sh��)�z�y��Ʒ�g�ğɹ���̖(h��o)���ڸɔ_��
��(chu��ng)�µ��x��ʽ�ăx��ͨ���x��LED���l(f��)��PMT�z�y���x��ʽ���O(sh��)Ӌ(j��)�ϱ�����߅��Ч��(y��ng)��LED��Դ�����Դ��(du��)��(sh��)�(y��n)�]��Ӱ�����˟o����������ɹ�Ⱦ��У���x��������ʹ�É����L�o�轛(j��ng)�����Q��PMTÿ��ֻ���ռ���(g��)�ɹ���̖(h��o)�����Ǚz�y�`���ȸ������@x���\(y��n)���ٶȷdz�������Ҳ���ژӱ���С���IJİ��F���]���ݶȹ��������ڕr(sh��)�g�e�ֵ�ȱ�c(di��n)��
�S���ɹⶨ��PCR���g(sh��)��ʹ�������ăx�����a(ch��n)�̼����ڂ��y(t��ng)��96�װ�x���ϴ������M(j��n)��������Stratagene��Mx3000p�ڙz�y��ͻ����ʹ��CCD����PMT�z�y�ɹ���̖(h��o)���������ˌ�(sh��)�(y��n)���`�����������l(f��)��Դ��Ȼ���Â��y(t��ng)���u�u�����қ]���ݶȹ�����Eppendorf ��˾�Ƴ���Mastercycler ep realplex��һ����ݶȹ��ܵğɹⶨ��PCR�x��ʹ����96��(g��)LED�鼤�l(f��)��Դ���������M(j��n)��CPM���ڶ���PMT����96��һ���w��z�yϵ�y(t��ng)������������߅��Ч��(y��ng)߀���C���И�Ʒ�g�ğɹ���̖(h��o)�]�иɔ_��
3�� �\(y��n)���ٶ�
�ڟɹⶨ��PCR�x�ı��༼�g(sh��)����(sh��)�����������ٶ�Ҳ�ǏS��ϲ�g����������ָ��(bi��o)������������������Կs�̷���(y��ng)�M(j��n)�еĕr(sh��)�g�����ҿs���˿��ܵķ��خ��ԽY(ji��)��������(y��ng)�ĕr(sh��)�g�����PCR���خ��������˸��õ���Ɍ�(sh��)�(y��n)������(g��)�S�Ҽ����Ƴ��ܿ����\(y��n)�еğɹⶨ��PCR�x������ROCHE�Ƴ���Lightcycler2.0���ÿ՚��(d��ng)���W(xu��)ԭ�������ڰ�С�r(sh��)�������30-40��(g��)ѭ�h(hu��n)��ABI��7500�����x��FASTģ�K����5��C/����������ٶ�������40����������30-40��(g��)ѭ�h(hu��n)�����eppendorf���Ƴ���Mastercycler ep realplex4S ��2S���y�|(zh��)ģ�K�ɹⶨ��PCR�x �������ص��ٶȿ��_(d��)��6��/���4.5/������Ŀǰͬa(ch��n)Ʒ���������ٶ����ğɹⶨ��PCR �x��һ��(g��)�������x����ԭ����Ҫ40��60��犵�PCR����(y��ng)��eppendorf Mastercycler ep realplex4S ��2S (�y�|(zh��)ģ�K)ֻ���\(y��n)��28��犡���?ji��ng)eС���@��(ji��)�s���Ď�ʮ�����һ�����Ϳ��Զ��\(y��n)�кÎ�݆�ˡ�
4�� �`����
��Ҏ(gu��)ģ��æ�Č�(sh��)�(y��n)���O(sh��)���Ȼ���wĽ�����dz�Ҏ(gu��)��(sh��)�(y��n)��ͬ�ӿ����о��ʵ��x����F(xi��n)�ڵăx������(y��ng)�̓��б��༼�g(sh��)���ң��е�߀���ṩ����(g��)��������W(xu��)�Ļ��A(ch��)�о�ƽ�_(t��i)�������˽����M�����F(xi��n)�ڵ�������߀���]���������׃������������(j��)���Qģ�K��